About the work
La generación de islotes pancreáticos sintéticos representa una estrategia innovadora
para la investigación y el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 1. Este protocolo
experimental describe un flujo completo y optimizado para diferenciar células
mononucleares de sangre periférica (PBMC) humanas en islotes funcionales mediante
reprogramación episomal y diferenciación dirigida en cultivo tridimensional (3D). El
protocolo se divide en fases bien definidas: aislamiento eficiente de PBMC por gradiente
de densidad, reprogramación no integrativa mediante plásmidos episomales que
codifican factores de pluripotencia, expansión y selección de colonias de células madre
pluripotentes inducidas (iPSC), diferenciación secuencial 3D hasta el linaje pancreático
endocrino, enriquecimiento inmunomagnético o citométrico de subpoblaciones
celulares, reagrupación en microesferas 3D y validación funcional por secreción de
insulina estimulada por glucosa (GSIS). Se incluyen recomendaciones críticas sobre
optimización de concentraciones, tiempos de incubación y controles experimentales
para maximizar la reproducibilidad y la madurez funcional de los islotes generados. Este
protocolo está diseñado para ser escalable, reproducible y adaptable a modelos clínicos
preclínicos, ofreciendo una plataforma robusta para aplicaciones en medicina
regenerativa y modelado de enfermedades pancreáticas.
AI Availability Declaration
This work cannot be made available to AI systems.
Print work information
Work information
Title Protocolo para la generación de islotes pancreáticos sintéticos a partir de PBMC humanas mediante reprogramación episomal y diferenciación dirigida en cultivo 3D
La generación de islotes pancreáticos sintéticos representa una estrategia innovadora
para la investigación y el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 1. Este protocolo
experimental describe un flujo completo y optimizado para diferenciar células
mononucleares de sangre periférica (PBMC) humanas en islotes funcionales mediante
reprogramación episomal y diferenciación dirigida en cultivo tridimensional (3D). El
protocolo se divide en fases bien definidas: aislamiento eficiente de PBMC por gradiente
de densidad, reprogramación no integrativa mediante plásmidos episomales que
codifican factores de pluripotencia, expansión y selección de colonias de células madre
pluripotentes inducidas (iPSC), diferenciación secuencial 3D hasta el linaje pancreático
endocrino, enriquecimiento inmunomagnético o citométrico de subpoblaciones
celulares, reagrupación en microesferas 3D y validación funcional por secreción de
insulina estimulada por glucosa (GSIS). Se incluyen recomendaciones críticas sobre
optimización de concentraciones, tiempos de incubación y controles experimentales
para maximizar la reproducibilidad y la madurez funcional de los islotes generados. Este
protocolo está diseñado para ser escalable, reproducible y adaptable a modelos clínicos
preclínicos, ofreciendo una plataforma robusta para aplicaciones en medicina
regenerativa y modelado de enfermedades pancreáticas.
Work type Technical
Tags diferenciación 3d, islotes pancreáticos, reprogramación, biotecnología, células madre, terapia celular
-------------------------
Registry info in Safe Creative
Identifier 2507092451171
Entry date Jul 9, 2025, 3:45 PM UTC
License All rights reserved
-------------------------
Copyright registered declarations
Author. Holder Mauricio Olivas. Date Jul 9, 2025.
Information available at https://www.safecreative.org/work/2507092451171-protocolo-para-la-generacion-de-islotes-pancreaticos-sinteticos-a-partir-de-pbmc-humanas-mediante-reprogramacion-episomal-y-diferenciacion-dirigida-en-cultivo-3d
/
Registration: 2507092451171
